Abstract
Introduzione: il MODY-8 è una forma di diabete monogenico caratterizzato da una mutazione nel gene CEL (carbosil-estere lipasi), che determina una disfunzione del pancreas esocrino e conseguente danno beta-cellulare. La relazione tra la disfunzione esocrina e la morte delle beta cellule non è ancora del tutto chiara. La nostra ipotesi è che le cellule beta di per sé non siano influenzate dalla mutazione del gene CEL e pertanto che le iPSC del paziente con MODY-8 offrano la possibilità di un trattamento del diabete con trapianto di cellule beta autologhe derivate da iPSC. Lo scopo di questo studio è quindi quello di generare cellule beta dalle iPSC del paziente con MODY-8. Metodi: le iPSC sono state riprogrammate dai fibroblasti della pelle del paziente e sono state caratterizzate per determinarne la pluripotenza. Le iPSC MODY-8 sono state differenziate in cellule endocrine pancreatiche mediante un protocollo in vitro che mima le diverse fasi dell’organogenesi pancreatica. Risultati: sono stati ottenuti e caratterizzati sei cloni di iPSC MODY-8. Le iPSC MODY-8 sono capaci di differenziare in cellule beta: infatti le cellule beta terminalmente differenziate risultano essere positive per i marcatori di beta cellula Pdx1 (80±11%), Nkx6.1 (37±9%) e Insulina (13±3%). Il gene CEL non è espresso nelle iPSC e in nessuna fase del differenziamento. Le cellule beta derivate dalle iPSC MODY8 secernono ormoni pancreatici in condizioni basali, e il test di perifusione dinamica ha rivelato che secernono insulina in seguito allo stimolo di glucosio. Conclusioni: le iPSC MODY-8 sono in grado di differenziare in cellule endocrine pancreatiche e la loro funzione è mantenuta nelle cellule mutate. Ulteriori analisi, incluso il trapianto delle cellule beta derivate dalle iPSC MODY8 in topi diabetici, sono in corso allo scopo di confermare che la mutazione del gene CEL non influenza il differenziamento e la funzione delle cellule beta in vivo. Questi risultati pongono le basi per poter modellare in vitro la malattia e per il trapianto personalizzato di cellule beta nei pazienti con MODY-8.
Tipo: CO
Codice: 81